产品信息•重组胰岛素生产用酶

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重组胰蛋白酶
 
 
重组胰蛋白酶 
 RPT0201

 
CAS:9002-07-7  EC:3.4.21.4


无动物源性,无杂酶污染

【重组胰蛋白酶|产品简介

酶切位点:胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割赖氨酸(Lysine、K)以及精氨酸(Arginine、R) C末端肽键。

氨基酸序列:雅心重组猪胰蛋白酶是由重组大肠杆菌表达生产,氨基酸序列与猪胰腺来源的胰蛋白酶完全一致。

酶学性质:重组猪胰蛋白酶具有与动物源性猪胰蛋白酶相同的酶学性质,可替代猪胰腺来源胰蛋白酶应用于各种生物技术过程中。

基本特性:重组胰蛋白酶分子量24kD,最适pH为7.0-11.0。活性受丝氨酸蛋白酶抑制剂如PMSF等的抑制,金属离子螯合剂如EDTA等的抑制。


【重组胰蛋白酶|产品特性】

 

来源 重组大肠杆菌
产品外观 白色、类白色、类黄色粉末
比活 ≥3800 USP units/mg pro.
纯度(RP-HPLC) ≧70% β-胰蛋白酶,≦20% α-胰蛋白酶
分子量(蛋白电泳) 24.0±2.4 kDa
备注:25℃,pH7.6,反应体系3.2ml (1cm 光路),每分钟酶解BAEE使253nm下的吸收值增加0.003定义为一个USP单位。

重组胰蛋白酶|使用方法

1mMHCl溶解,使得重组胰蛋白酶浓度为1-10mg/ml。使用时,酶量:目的蛋白=1:50-1:1000,最适pH为7.0-11.0。

重组胰蛋白酶|储存运输

储存稳定性:重组胰蛋白酶冻干粉存于2-8℃,24个月稳定;1mM盐酸或50mM醋酸溶解后储存于-20℃,反复冻融10次,无活性损失。
运输稳定性:蓝冰保温运输,活性稳定。

重组胰蛋白酶|产品优势

无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。

纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。

冻干粉:易于储存和运输。

符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。

质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。

重组胰蛋白酶|产品用途

重组胰岛素的生产:重组胰蛋白酶可用于重组胰岛素的生产,使用重组人胰岛素原表达法是仿照天然途径来合成胰岛素,主要分为基因工程菌的构建和后期使用胰蛋白酶与羧肽酶B进行酶切,胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,可特异切割赖氨酸及精氨酸C末端肽键,在该过程中将胰岛素原中的C链切割掉。


 














 

细胞培养方面 分子领域
1、原代细胞的获取,用于组织块的消化解离 1、用于特异性的蛋白质酶解
2、用于贴壁细胞的传代消化 2、蛋白测序、蛋白组学研究
3、用于微载体方法培养的细胞消化 3、制作肽谱图
4、用于严禁接触动物源的生物制药等领域 4、PAGE胶上的肽段的胰酶消化

 

重组胰蛋白酶|相关产品

重组羧肽酶B序列分析纯胰蛋白酶;重组人胰蛋白酶;重组肠激酶

 
 
 
▼客户问答

1、第一次使用重组胰酶,按传统方法进行保存了?并且反复冻融,对活性有影响吗?

答:严格按说明书要求2-8℃保存,避免反复冻融,重组胰酶经过极限测试反复冻融十次活性无明显变化,相比传统胰酶更为稳定,如误操冷冻后溶解可继续使用。
 
2、重组胰酶消化特点与传统胰酶一致吗?有什么特殊或需要注意的地方?

答:重组胰酶消化要比传统胰酶较快速,故大部分细胞消化时间会有所提前,需要避免消化过度,其它步骤与传统胰酶无差别 。

3重组胰蛋白酶用于消化人脐带间充质干细胞应该怎么使用?多少浓度?

答:使用HBSS或者用于细胞消化的缓冲液将重组胰蛋白酶溶解,使得蛋白浓度(是蛋白浓度不是粉末浓度要注意,用粉末中的蛋白含量计算)为0.1mg/ml,在0.1mg/ml附近优化就可以了。

 

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